通过了同步等级测试(即序幕的练习场景),先祖记忆的世界开始建立,主角将依附在先祖身上,揭开圣殿骑士想从主角祖先身上得到的秘密。场景切换到1754年的伦敦,玩家扮演Haytham kenway,正在前往剧院的路途中。在剧院中与Reginald对话后,开启鹰眼,发现目标此时正藏匿在最高处的包厢中。离开座位,通过楼梯爬到剧院的第二层包厢的外围,在沿着外围一路往上爬到尽头,翻到剧场上方的入口,发现门已上锁,使用按住左摇杆与右摇杆调整撬锁的位置,再按下RT键将门锁撬开。再跳到太阳挂饰上,会落下一段高度,翻到旁边的平台,在跳到月亮挂饰上,通过墙壁攀爬目标包厢外的走廊,开门进入。对话后按下X键将其杀害,取下他脖子上的一枚铜币后离开。
女仆进入贵宾室后发现尸体,剧场内一片混乱,主角很淡定地走到大门离开,门外有马车的接应。带着得到的铜币来到地下组织,组织头目认为铜币是一枚钥匙,能打开的门背后一定藏有不为人知的秘密,并且肯定英国皇室此刻也在寻找这一切。具体地点未知,主角的当前任务便是前往美国锁定目标,抢在对手之前找到答案。